21/2/10

Columnas de anexina , Test de tunel , Desfragmentacion ADN

DEFINICIÓN DE FRAGMENTACIÓN DEL DNA ESPERMÁTICO

¿Qué es la fragmentación del DNA espermático y cuál es su importancia?
La fragmentación del DNA espermático, tal y como indica su nombre, se refiere a roturas o lesiones en el material genético del espermatozoide.

A mayor número de lesiones, menor será la integridad del material genético y las probabilidades de que se produzca un embarazo a término.

¿Pueden ser reparadas estas lesiones del DNA?
En algunos casos el ovocito puede reparar el daño del DNA del espermatozoide que lo ha fecundado. Esto va a depender de varios factores:

-El tipo de lesión del DNA.
-El porcentaje de DNA del espermatozoide afectado.
-La calidad del ovocito, ya que de ello va a depender si se puede reparar o no el daño de DNA en el espermatozoide. Este parámetro está generalmente ligado a la edad de la paciente.

¿Es posible que entre muestra y muestra de un mismo paciente existan diferencias?
Sí, los niveles de fragmentación del DNA pueden diferir de una muestra a otra obtenida una o varias semanas después.

¿Existe algún tratamiento que mejore los niveles de fragmentación del DNA espermático?
Algunos estudios indican que el tratamiento con antioxidantes puede reducir significativamente los niveles de fragmentación de DNA. Aún así, existe la posibilidad de que algunos pacientes no respondan al tratamiento, sobre todo cuando el daño de DNA es inducido por factores tóxicos o altas temperaturas que activan caspasas y endonucleasas espermáticas. En estos casos la práctica recomendada sería el uso de espermatozoides procedentes de testículo, ya que se ha observado que su grado de fragmentación suele ser significativamente menor.

DIFERENCIAS ENTRE SEMINOGRAMA Y TEST PARA DETECTAR LA FRAGMENTACIÓN

¿Puede un seminograma detectar las lesiones en el material genético de un espermatozoide?
No, el seminograma valora otros parámetros de la muestra de semen como la concentración de espermatozoides, la motilidad de éstos o la morfología, pero no tiene en cuenta la integridad del material genético.

CAUSAS

¿Qué provoca que se dañe en el DNA del espermatozoide?
Las causas son varias y pueden ser de tipo intrínseco o inducidas por factores externos.

Los factores intrínsecos incluyen:
-Selección ineficiente: La producción de espermatozoides se localiza en los túbulos seminíferos (testículos) y en algunos casos los espermatozoides y sus células progenitoras sufren alteraciones de tipo genético que resultan en roturas del DNA. Estos espermatozoides dañados son generalmente seleccionados y eliminados, pero si el mecanismo de selección falla aparecen espermatozoides con el DNA fragmentado en el eyaculado.

-Maduración incorrecta: Los espermatozoides sufren un proceso de maduración en el epidídimo que se conoce como maduración epididimaria. Este proceso de maduración conlleva al empaquetamiento de la cromatina nuclear y la adquisición de la motilidad espermática. Si este proceso no se lleva a cabo correctamente se pueden producir lesiones en el DNA espermático.

Los factores externos incluyen:

-Daño inducido por radio/quimioterapia.
-Varicocele.
-Episodio de fiebre alta.
-Exposición a elevadas temperaturas.
Enfermedad inflamatoria aguda y crónica.
-El estrés oxidativo post-testicular : Durante el transporte de los espermatozoides a través del epidídimo se puede producir fragmentación del DNA espermático. Uno de los mecanismos principales es el relacionado con la producción de radicales libres, ya sea por espermatozoides inmaduros o por las células epiteliales del epidídimo, que dañan directamente el material genético del espermatozoide. Además, la activación de caspasas y endonucleasas espermáticas por factores tóxicos y temperaturas elevadas también puede inducir fragmentación del DNA.


MÉTODOS DE DETECCIÓN PARA LA FRAGMENTACION DEL DNA ESPERMATICO¿Cómo se detecta la fragmentación en el DNA espermático?
Existen varios métodos para medir los niveles de fragmentación. En nuestro centro utilizamos el test de TUNEL, que es el test recomendado por líderes de opinión en estudios de fragmentación de DNA.

¿En qué se diferencian un métodos del otros?
La mayoría de los test de fragmentacion, incluyendo el test SCSA y el test SCD, miden daño potencial y susceptibilidad a la desnaturalización del DNA y por ello tienen un nivel predictivo más bajo. Por el contrario, el test TUNEL mide daño real y tiene un alto valor predictivo en tecnicas de reproducción asistida. Actualmente el valor de corte de normalidad recomendado para el test TUNEL es del < 15%.

Para realizar el test TUNEL,
los espermatozoides se reaccionan con una enzima y aquellos espermatozoides con DNA fragmentado muestra o bien una coloracion por microscopia de campo claro o fluorescencia de color verde si se visualizan por microscopia de fluorescencia.

INDICACIONES CLÍNICAS

¿En qué casos está indicado el test de fragmentación del DNA espermático?
Este test se recomienda en los siguientes casos:

-Infertilidad idiopática (de causa desconocida)
-Tras fallos repetidos en técnicas de reproducción asistida.
-Casos donde se ha observado una mala calidad embrionaria.
-Pacientes que han sufrido abortos de repetición.
-Varicocele.
-Varones con edades superiores a los 45 años.
-Casos de congelación de semen (se comprueba que la muestra congelada tenga unos niveles de fragmentación aceptables).
-Episodio febril en los últimos 3 meses.


Este logro científico se realizó en el Centro Especializado en Reproducción (CER) de Buenos Aires y fue el primer embarazo obtenido con un sistema de Filtrado Selectivo de Esperma, denominado "Separación magnética con Columnas de Anexina V", según se publicó en el último número de la revista de la Sociedad Argentina de Medicina Reproductiva – SAMeR1.

Se trata de un procedimiento que promete ser especialmente útil en casos de infertilidad masculina con fallas reiteradas en intentos de fertilización asistida, en los que no se puede determinar la causa.

Aproximadamente 40 a 45% de los problemas de reproducción se deben a factores masculinos, y en 25% de los hombres no se encuentra explicación a la esterilidad.

La doctora Ester Polak de Fried, directora del departamento de Medicina Reproductiva del CER y profesora de Endocrinología Reproductiva de la Facultad de Medicina de la Universidad de Buenos Aires, explicó que "esta técnica experimental de filtrado selectivo de espermatozoides permite separar a los sanos de aquellos que tienen una alta fragmentación de ADN y por lo tanto no prosperarán en un procedimiento de fertilización asistida".

Los espermatozoides seleccionados se emplean para fecundar el óvulo mediante ICSI (Inyección Intracitoplasmática de un espermatozoide), y posteriormente se transfiere el embrión al útero de la madre.

En este caso, los papás habían intentado en reiteradas oportunidades concretar un embarazo mediante reproducción asistida, pero sólo obtuvieron fallos sin respuesta a la causa de los fracasos.

Después de muchos años de espera, y gracias a esta técnica, hicieron realidad su sueño de ser padres.

El filtrado selectivo con Columnas de Anexina-V ya se utilizaba en el mundo para otras aplicaciones, pero se aplicó por primera vez en medicina reproductiva en la Argentina.

Los resultados obtenidos por el CER sugieren que el uso de Columnas de Anexina-V es seguro, y que mejora las tasas de embarazo en parejas con fracasos repetidos de fertilización in vitro e ICSI (FIV/ICSI).

Este caso, junto a otro de mellizos aún en gestación, será publicado en la revista científica Fertility & Sterility, bajo el título Single and twin ongoing pregnancies in two cases of previous ART failure after ICSI performed with sperm sorted using Annexin V microbeads.

Se trata de la primera publicación científica internacional que reportará casos bien documentados de embarazos a término utilizando este método de tratamiento de esperma.

Filtrado selectivo
En los espermatozoides, como en todas las células del organismo, se puede desencadenar un mecanismo de muerte celular programada o "apoptosis", que determina su autodestrucción.

Gracias a nuevas tecnologías fue posible determinar que ciertos hombres tienen un alto porcentaje de espermatozoides apoptóticos, lo que se traduce en fragmentación del ADN. Esta ruptura del material genético del espermatozoide lleva al fracaso de los intentos de fertilización asistida.

La especialista explicó que los flamantes papás se acercaron al CER tras múltiples intentos fallidos. Mediante diversos análisis, se determinó que el paciente tenía un alto porcentaje de fragmentación de ADN.

Para solucionar este problema, se decidió recurrir a una innovadora técnica de filtrado de esperma, que consiste en aplicar una carga magnética a los espermatozoides dañados y filtrarlos a través de un dispositivo denominado "Columnas de Anexina-V".

Los espermatozoides "malos" tienen un marcador de apoptosis, la fosfatidilserina, un fosfolípido que se une a la proteína Anexina-V.

Para el procedimiento, se cargan magnéticamente Anexinas que se "pegan" a los espermatozoides con fragmentación de ADN. Luego se pasan los espermatozoides por un filtro "imantado", y aquellos que son apoptóticos quedan adheridos a las paredes de las columnas, mientras que por el filtro fluyen los espermatozoides sanos.

El esperma seleccionado se utiliza luego para fertilizar al óvulo y así lograr la concepción.

La doctora Polak comentó que "posiblemente, en el futuro este método de filtrado se aplique en otros casos de infertilidad masculina, puesto que mejora las probabilidades de éxito en los intentos de reproducción asistida al seleccionar los espermatozoides con menor fragmentación de ADN".

4 comentarios:

  1. Gracias por esta entrada en el blog. Me ha parecido interesantisimo y he aprendido un poquito mas.
    Un saludo desde:
    www.onlyforbabies.blogspot.com

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  2. A ti por pasar por mi blog , toda info que nos ayude a to perder tiempo ni dinero en nuestros futuros tratamientos es muy útil. besitos

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  3. Hola amiga, que bueno este post!!! Nos ayuda a todas a comprender un poco mas por lo que algunas parejas tenemos que atravesar en este camino. Te quieroooooo
    besitos

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  4. Hola luego de dos tratamientos icsi y picsi estamos probando las columnas de anexina y con el favor de Dios daremos buenas noticias...Gracias por este post..

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